ردیابی اختصاصی phytopthora inundata از طریق واکنش زنجیره ای پلیمراز ساده و تودرتو

نویسندگان

رضا مستوفی زاده قلمفرسا

چکیده

گونة  phytophthora inundataبه تازگی توصیف شده و به علت خصوصیات ریخت­شناختی و حداکثر دمای رشد غیرعادی، شناسایی آن دشوار است. این گونه با سایر گونه­های بیمارگر گیاهی جنس phytophthoraکه بدون پاپیل و گرماپسند هستند، اشتباه می­شود. در این بررسی برای شناسایی p. inundataشیوه­ای براساس واکنش زنجیره­ای پلیمراز ساده و تودرتو ابداع شد. بدین منظور مجموعه­ای از جدایه­ها مربوط به میزبان­های مختلف که نمایندة تنوع موجود در توالی نواحی رمزگذار و فاقد رمز این گونه بودند، مورد بررسی قرار گرفت. براساس توالی­های جداکنندة نسخه­برداری شدة داخلی یک و دو و ژن 8/5 اس مربوط به دی­اِن­اِی ریبوزومی (آی­تی­اِس)، ژن پروتئین مقاوم به شوک حرارتی 90، ژن­های پروتئین پیوستة تریوزفسفات ایزومراز/گلیسرآلدئید سه فسفات دی هیدروژناز و هم چنین ژن پروتئین 60 اس ریبوزومی ال 10، برای گونة مذکور ده عدد آغازگرِ واکنش زنجیره­ای پلیمراز اختصاصی طراحی گردید. برای ایجاد بیشترین اختصاصیت و کارآیی، دمای جفت­شدگی و زمان گسترش برای هر جفت آغازگر بهینه­سازی گردید. برای ارزیابی آغازگرها از 28 گونة دیگر فیتوفتورا که از نظر ریخت­شناختی و مولکولی تأیید شده بودند، استفاده شد. در اغلب موارد هیچ­یک از مجموعه آغازگرها قادر به فزون­سازی دی­اِن­اِی خالص­سازی شده از گونه­های phytophthora غیرخودی نبودند. واکاوی­ها نشان داد که بهترین نامزد برای شناسایی جدایه­های p. inundata مجموعة its-i1 می­باشد که از ترکیب آغازگرهای its-if1 و its-if2 تشکیل شده است. دمای جفت­شدگی بهینه برای این مجموعه 69 درجة سانتی­گراد و بهترین زمان گسترش 40 ثانیه می­باشد. به نظر می­رسد استفاده از واکنش زنجیره­ای تودرتو با استفاده از مجموعة its-i1 به همراه آغازگرهای عمومی its4 و its6 به عنوان آغازگرهای خارجی حداقل 50 برابر حساس­تر از روش سنتی است.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

ردیابی اختصاصی Phytopthora inundata از طریق واکنش زنجیره‌ای پلیمراز ساده و تودرتو

گونة  Phytophthora inundataبه تازگی توصیف شده و به علت خصوصیات ریخت‌شناختی و حداکثر دمای رشد غیرعادی، شناسایی آن دشوار است. این گونه با سایر گونه‌های بیمارگر گیاهی جنس Phytophthoraکه بدون پاپیل و گرماپسند هستند، اشتباه می‌شود. در این بررسی برای شناسایی P. inundataشیوه‌ای براساس واکنش زنجیره‌ای پلیمراز ساده و تودرتو ابداع شد. بدین منظور مجموعه‌ای از جدایه‌ها مربوط به م...

متن کامل

شناسایی و ردیابی اختصاصی phytopthora drechsleri، p. cryptogea و p. erythroseptica با واکنش زنجیره ای پلیمراز

گونه های phytophthora drechsleri، p. cryptogea و p. erythroseptica بیمارگرهای گیاهی اُاُمیستی خویشاوندند و از نظر ریخت شناختی به یک دیگر شباهت دارند. برای تمایز این آرایه ها از یک دیگر و از سایر گونه هایی که صفات ریخت شناختی همگرا دارند، شیوه ای بر اساس واکنش زنجیره ای پلیمراز ساده و تودرتو ابداع شد. بدین منظور مجموعه ای از جدایه ها مربوط به میزبان های مختلف، که نماینده ی تنوع موجود در ژن های هست...

متن کامل

شناسایی و ردیابی اختصاصی ‌Phytopthora drechsleri، P. cryptogea و P. erythroseptica با واکنش زنجیره‌ای پلیمراز

گونه‌های Phytophthora drechsleri، P. cryptogea و P. erythroseptica بیمارگرهای گیاهی اُاُمیستی خویشاوندند و از نظر ریخت‌شناختی به یک‌دیگر شباهت دارند. برای تمایز این آرایه‌ها از یک‌دیگر و از سایر گونه‌هایی که صفات ریخت‌شناختی همگرا دارند، شیوه‌ای بر اساس واکنش زنجیره‌ای پلیمراز ساده و تودرتو ابداع شد. بدین منظور مجموعه‌ای از جدایه‌ها مربوط به میزبان‌های مختلف، که نماینده...

متن کامل

تشخیص و ردیابی مایکوپلاسما سینوویه از مرغداری های صنعتی بااستفاده از روش واکنش زنجیره ای پلیمراز بر اساس ژنvlhA

مایکوپلاسما سینوویه مهمترین عامل بیماریزا در ماکیان است و همه سالهخسارات اقتصادی قابل توجهی را متوجه صنعت طیور در ایران می سازد. مایکوپلاسما سینوویه قادر به بیان لیپوپروتئین هماگلوتینین متغیرvlhA  Variable lipoprotein hemagglutinin A می باشد که نقش مهمی در ایجاد بیماری ایفا می کند. هدف اصلی این مطالعه تشخیص و شناسایی جدایه های مایکوپلاسما سینوویه بر اساس ژنvlhA  بود. از گله های طیور صنعتی سه اس...

متن کامل

آغازگرهای اختصاصی مبتنی بر واکنش زنجیره ای پلیمراز برای ردیابی picoa lefebvrei در ریشه های carex stenophylla

گونه های picoa، آرایه های آسکومیست زیرزمینی می باشند که در نواحی نیمه خشک شمال آفریقا، غرب آسیا، جنوب اروپا و کشورهای خاورمیانه از جمله ایران یافت می شود. گونه های این جنس با ریشه گیاهان علفی یک ساله و چند ساله از جنس helianthemum شامل:h. ledifolium،h. salicifolium var. salicifolium ، h. nummularium و h. squamatum تشکیل قارچ-ریشه می دهند. در ایران، رابطه قارچ-ریشه بین دنبل های بیابانی و گیاهان ...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
بیماریهای گیاهی

ناشر: انجمن بیماری شناسی گیاهی ایران

ISSN 2774-0006

دوره 48

شماره 1 2012

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023